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dimanche 18 juin 2023

Quand Pseudomonas spp. aide à la survie de Listeria monocytogenes dans les environnements alimentaires

Un article paru dans microorganisms a pour titre, «High Disinfectant Tolerance in Pseudomonas spp. Biofilm Aids the Survival of Listeria monocytogenes» (Une haute tolérance aux désinfectants des biofilms de Pseudomonas spp. aide à la survie de Listeria monocytogenes).

Résumé

Pseudomonas spp. sont les bactéries les plus couramment retrouvées dans les environnements de transformation des aliments en raison de propriétés telles qu'un taux de croissance élevé à basse température, une tolérance élevée aux agents antimicrobiens et la formation de biofilms. Dans cette étude, un ensemble d'isolats de Pseudomonas provenant de surfaces nettoyées et désinfectées dans une installation de transformation du saumon ont été examinés pour la formation de biofilm à 12°C. Une forte variation dans la formation de biofilm entre les isolats a été observée. Des isolats sélectionnés, à la fois à l'état planctonique et à l'état de biofilm, ont été testés pour leur résistance et/ou tolérance à un désinfectant couramment utilisé (à base d'acide peracétique) et à l'antibiotique florfénicol. La plupart des isolats ont montré une tolérance beaucoup plus élevée à l'état de biofilm qu'à l'état planctonique. Dans une expérience de biofilm multi-espèces avec cinq souches de Pseudomonas avec et sans souche de Listeria monocytogenes, le biofilm de Pseudomonas a semblé favoriser la survie des cellules de L. monocytogenes après désinfection, soulignant l'importance de contrôler la charge bactérienne dans les environnements de transformation des aliments.

Conclusion

Les espèces du genre Pseudomonas se trouvent couramment dans les environnements alimentaires, et certaines d'entre elles sont reconnues comme d'importantes bactéries responsables de l’altération des aliments. Cependant, en termes de sécurité des aliments, les membres de ce genre ont souvent été négligés car ils ne sont pas directement associés aux infections d'origine alimentaire chez l'homme.

Dans cette étude, nous avons démontré la variation de la capacité de formation de biofilm dans des conditions données dans différents isolats provenant d'une installation de transformation du saumon. Nous avons également démontré la variation de la tolérance aux désinfectantx à base d’acide peracétique, Aqua Des Foam PAA, régulièrement utilisé dans les installations de transformation des aliments, et à un antibiotique pertinent pour l'aquaculture, révélant que de nombreux isolats de Pseudomonas ont une tolérance inhérente élevée au désinfectant, en particulier au sein d’un biofilm. La résistance au florfénicol était également élevée dans plusieurs isolats, avec des valeurs de CMI de 2400 μg/mL et plus. En fin de compte, nous avons montré comment la tolérance à la formation de biofilm et aux désinfectants de Pseudomonas spp. peut aider à la survie de Listeria monocytogenes. Ce faisant, Pseudomonas spp. résidant dans l'environnement de transformation des aliments menace indirectement la sécurité des aliments.

Mise à jour du 2 juillet 2023

On lira l'article paru sur ce sujet dans Food Safety Magazine.

dimanche 4 décembre 2022

Comment les agents pathogènes survivent et se développent dans un climat changeant

«Comment les agents pathogènes survivent et se développent dans un climat changeant», source article d’Ashley Mayrianne dans Microcosm, le magazine de l’American Society for Microbiology. Extraits.

De nombreuses études sont arrivées à la même conclusion : un changement climatique influencera la santé et le bien-être des humains et de leur environnement. Les changements de température, de précipitations, d'humidité, de concentrations de CO2 et de disponibilité des nutriments peuvent augmenter le risque de maladies à transmission vectorielle et zoonotiques, à la fois dans de nouvelles zones géographiques et dans les endroits où ces maladies sont déjà endémiques ou éradiquées.

Une revue systématique de la littérature publiée en août 2022 a prédit que 58% des maladies pathogènes humaines sont susceptibles de s'aggraver avec le changement climatique. L'impact du changement climatique sur la santé mondiale devrait être si grave que l'Organisation mondiale de la santé l'a qualifié de «la plus grande menace pour la santé de l'humanité», estimant que les coûts de santé directs totaliseront entre 2 et 4 milliards de dollars d'ici 2030 en raison de augmentation des décès dus à la malnutrition, au paludisme, à la diarrhée et au stress thermique, entre autres facteurs. Les scientifiques s'attendent à voir la charge la plus élevée des maladies liées au climat dans les pays et les communautés à faibles ressources. Les personnes immunodéprimées ou qui ont des allergies respiratoires, nutritionnelles et saisonnières préexistantes seront également plus à risque.

Pourquoi le changement climatique augmente-t-il le risque de maladie ?
En général, un temps plus doux est plus propice à la survie et à la reproduction microbiennes. Pourtant, selon le Dr Arturo Casadevall, directeur du département de microbiologie moléculaire et d'immunologie W. Harry Feinstone et professeur à la Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health, le problème n'est pas simplement un temps plus chaud en moyenne. «Les gens disent ‘le monde ne se réchauffe que d'un degré’ ; ce n'est pas la bonne façon de penser. Chaque fois que vous avez une journée très chaude, c'est un événement de sélection», a-t-il dit. À mesure que le climat change, les microbes doivent s'adapter à la «nouvelle normalité», offrant aux agents pathogènes des opportunités de se déplacer et d'évoluer de manière inconnue, ce qui peut augmenter la virulence et la gamme d'hôtes. Alors que les humains se déplacent vers de nouveaux environnements pour éviter les impacts du changement climatique, ils peuvent également rencontrer de nouveaux agents pathogènes contre lesquels ils manquent d'immunité naturelle. L'évolution humaine ne peut tout simplement pas suivre.

«L'une des raisons pour lesquelles [les humains] ne s'inquiètent pas [actuellement] des maladies fongiques … c'est parce que nous avons chaud», a dit Casadevall. «La plupart des champignons ne peuvent pas se développer à la température de notre corps», mais infectent plutôt les créatures à température ambiante, comme les reptiles et les amphibiens, ou n'affectent les humains qu'au niveau de la peau. Cependant, «les champignons s'adaptent», a-t-il averti. «Alors que le monde se réchauffe, ils apprennent à pousser à des températures plus élevées.»

Les travaux de Casadevall au cours de la dernière décennie décrivent la capacité du champignon Candida auris à s'adapter et à survivre à des températures élevées (supérieures à 37°C), brisant la zone d'exclusion thermique protégeant autrement les humains contre l'infection. «Le problème avec le changement climatique est que le pilier qu'est la température peut être surmonté si les champignons s'adaptent», a-t-il dit, en particulier compte tenu des recherches montrant que la température moyenne du corps humain est en baisse.

L'hypothèse climatique de Casadevall est née du fait que trois isolats uniques de C. auris sont apparus simultanément sur trois continents, la tolérance à la température étant le dénominateur commun. Cette hypothèse est apparemment étayée par des recherches en Inde qui ont révélé que C. auris isolé d'une plage peuplée avait une tolérance à la température plus élevée qu'un isolat séparé d'un marais, indiquant que le champignon aurait pu s'adapter à différents environnements.

La suite est à lire dans cet article passionnant …

NB : La photo représente la couverture de Microcosm, (Re)Emergence of Infectious Diseases.

jeudi 20 octobre 2022

Survie de Listeria monocytogenes et de Salmonella sur des surfaces dans l'environnement sec du conditionnement et efficacité du nettoyage à sec

«Survie de Listeria monocytogenes et de Salmonella sur des surfaces dans l'environnement sec du conditionnement et efficacité des processus de nettoyage à sec sur la réduction des pathogènes», source Center for Produce Safety. Il s'agit d'un programme de recherche proposé par Paul Dawson qui me semble utile d'où sa diffusion sur le blog. Merci à Food Safety News de m'avoir donné l'idée de cet article.

Points clés à retenir
- Le projet a examiné la survie de Listeria monocytogenes et de Salmonella sur des surfaces sèches d'ateliers de conditionnement de pêches simulées en laboratoire.
- Les chercheurs ont mesuré la mortalité de cellules séchées et de biofilms dans différentes conditions environnementales.
- La prochaine étape évaluera l'efficacité des désinfectants de qualité alimentaire sur les cellules et les biofilms en laboratoire.
- Conjugués aux essais en usine pilote, les résultats aideront à identifier les pratiques de management visant à réduire la présence de pathogènes dans un environnement sec.

Résumé
Salmonella et Listeria monocytogenes sont d'importants pathogènes d'origine alimentaire impliqués dans les épidémies d'origine alimentaire liées à la consommation de produits et de fruits frais. La contamination des produits frais est problématique car ces produits sont généralement consommés sans chauffage. Pour éviter les événements de contamination, l'industrie du conditionnement doit s'appuyer sur des pratiques rigoureuses de nettoyage-désinfection , y compris dans les zones sèches de l'atelier de conditionnement. Cette étude propose de développer des outils d'information sur les taux de mortalité des pathogènes exposés au stress matriciel. Des expériences permettront de réassembler les conditions du conditionnement. Des cellules planctoniques séchées et des biofilms séchés formés par le microbiote de l’atelier de conditionnement et L. monocytogenes ou Salmonella simuleront les surfaces et les conditions environnementales de l'industrie du conditionnement. Les expériences étudieront les conditions qui favorisent la transition des cellules planctoniques présentes sur les surfaces pour former des communautés intégrées ou des biofilms attachés, et la formation de cellules viables mais non cultivables. Les études d'inactivation fourniront des données sur les meilleures pratiques concernant la méthodologie de nettoyage à sec et de désinfection dans l‘atelier de conditionnement et l'élimination des pathogènes d'origine alimentaire. Ces résultats seront validés pour une utilisation pratique dans l'atelier de conditionnent, dans une grande étude d'usine pilote afin de réduire la charge de micro-organismes sur l'équipement et les produits. Les résultats de cette étude permettront d'améliorer la maîtrise des pathogènes en plus des bonnes pratiques agricoles de base.

Résumé technique
Le pourcentage de denrées alimentaires contaminées par des pathogènes d'origine alimentaire a augmenté au cours de la dernière décennie. Ces produits sont souvent consommés crus ou avec un minimum de transformation ou de préparation, ce qui contribue au risque de maladies d'origine alimentaire. Salmonella et Listeria monocytogenes sont deux pathogènes bactériens d'origine alimentaire préoccupants pour l'industrie des fruits et légumes. Une entreprise de conditionnement a émis en 2016 le premier rappel de certains fruits à noyau en raison d'inquiétudes concernant la contamination par Listeria monocytogenes. Un autre rappel dans plusieurs États de pêches en 2020 impliquait une contamination par Salmonella. De plus, Salmonella et Listeria monocytogenes sont des pathogènes importants pour d'autres produits tels que les légumes verts à feuilles, les tomates, les melons cantaloups et la mangue. En l'absence de toute pratique empêchant la survie des pathogènes sur le produit, l'exposition des produits frais à des surfaces de contact après récolte contaminées augmentera la probabilité de contamination et d'épidémies d'origine alimentaire. Dans certaines zones de l'atelier de conditionnement, la réglementation autorise l'utilisation de techniques de nettoyage à sec telles que l'aspiration ou la mise au rebut, suivies de l'utilisation de désinfectants secs pour les surfaces en contact avec les aliments ou les zones de la zone 1. L'utilisation ou la présence d'eau pourrait constituer un risque important de croissance de pathogènes d'origine alimentaire, de contamination croisée et de dissémination dans l'établissement. Cependant, les micro-organismes ont de multiples mécanismes d'adaptation microbienne et de survie dans des conditions sèches. La survie microbienne dans des conditions de faible humidité et de dessiccation présentes dans l'atelier de conditionnement peut entraîner une contamination croisée. De plus, des conditions sèches défavorables pourraient forcer les bactéries à entrer dans un état physiologique inactif, tel que viable mais non cultivable (VNC). La présence de cellules VNC a des implications sur la sécurité des aliments puisque ces micro-organismes peuvent ne pas être détectés lors d'un échantillonnage de routine pour la surveillance de l'environnement. Dans la recherche proposée, nous visons à déterminer la survie de cellules planctoniques associé à la surface sèche et des biofilms de L. monocytogenes et de Salmonella cultivés en combinaison avec la microflore généralement retrouvée sur des surfaces dans l'usine de conditionnement. Dans l'Objectif 1, les taux de mortalité des pathogènes seront déterminés ensemble pour des cellules planctoniques et des biofilms séchés sur des surfaces du conditionnement. Les expériences étudieront les conditions qui favorisent la transition des cellules planctoniques présentes sur les surfaces pour former des communautés intégrées ou des biofilms attachés (la question principale est de savoir quand et comment une cellule séchée devient un biofilm intégré). Les études d'inactivation dans l'objectif 2 fourniront des données sur les meilleures pratiques concernant la méthodologie de nettoyage à sec et de désinfection dans l’atelier de conditionnement et l'élimination des pathogènes d'origine alimentaire. L'Objectif 3, une étude en usine pilote, validera les résultats des Objectifs 1 et 2 pour une utilisation pratique dans l'usine de conditionnement, afin de réduire la charge de micro-organismes sur l'équipement et les produits. Ensemble, les données de laboratoire et les essais en usine pilote peuvent identifier les pratiques de management associées à une présence réduite de pathogènes dans l'environnement sec.

On pourra aussi retrouver une interview de Paul Dawson ici.

dimanche 11 septembre 2022

Belgique : La survie de 4 entreprises alimentaires sur 10 est en jeu. Même problèmatique en France !

«Les crises successives mettent en péril la survie de 4 entreprises alimentaires sur 10», source FEVIA (Fédération de l'industrie alimentaire belge) du 7 septembre 2022.

Deux entreprises alimentaires belges sur trois ont lancé leurs fusées de détresse financière ces derniers mois et 4 sur 10 risquent même de sombrer en cas de nouveau coup dur économique. Telles sont les conclusions inquiétantes d’une étude sur la résistance aux chocs que la fédération du secteur Fevia a commandée à Graydon. Bart Buysse, président de Fevia, appelle donc les responsables politiques et les partenaires de la chaîne à agir maintenant face à la gravité de la situation : «La combinaison de coûts historiquement élevés pour les matières premières, l’énergie et les salaires devient intenable pour nos entreprises, surtout si elles ne peuvent pas les répercuter sur leurs clients, principalement les supermarchés. Nos entreprises fournissent des emplois et des investissements dans notre pays depuis des années, mais aujourd’hui, elles ont besoin d’un soutien et de solutions concrètes. Nous le signalons depuis des mois. L’heure est grave. Ne pas agir maintenant c’est de la non-assistance à personne en danger !»

En bonne santé avant la crise du COVID, aujourd’hui en danger
Avec le score de résistance aux chocs, Graydon calcule la mesure dans laquelle une entreprise peut absorber un ou plusieurs chocs. Pour le secteur des boissons et des aliments, il apparaît que 87% des entreprises étaient en très bonne santé avant la crise du COVID. Aujourd’hui, 66% des entreprises alimentaires belges ne sont pas suffisamment résistantes aux chocs.

Pour 40% des entreprises, la situation est aujourd’hui carrément précaire. L’impact de la guerre en Ukraine et le cumul d’explosions des coûts des matières premières, de l’énergie et des salaires n’y sont bien sûr pas étrangers. Le manque de réserves – épuisées par les crises successives – pourrait faire sombrer ces entreprises en cas de nouveau choc. Comme 97% des entreprises alimentaires belges sont des PME (avec moins de 100 employés), ce sont elles qui sont le plus exposées.

L’explosion des coûts est intenable pour les entreprises alimentaires
L’étude de Graydon montre clairement que les entreprises alimentaires n’ont pas encore totalement digéré les conséquences négatives de la crise du COVID. D’un côté, la part des entreprises alimentaires belges ayant un score de résistance aux chocs alarmant a diminué grâce aux mesures de soutien corona. D’un autre, beaucoup de ces entreprises sont restées dans la zone de danger, entre autres à cause de l’impact du variant Omicron.
Entre-temps, presque tous les coûts ont atteint des sommets sans précédent. La comparaison de l’évolution des prix sur la période de janvier à août 2022 avec les mêmes périodes en 2021 et 2020 – au cours desquelles nos entreprises étaient déjà confrontées à des pénuries et à de fortes hausses de prix – montre que la situation risque de devenir intenable pour de nombreuses entreprises alimentaires :
Par ailleurs, une enquête auprès des membres de Fevia montre qu’à peine la moitié des entreprises alimentaires a obtenu une augmentation des prix de la part des supermarchés en 2022. De plus, dans la plupart des cas, elle représentait moins de la moitié de l’augmentation des coûts. Les membres de Fevia s’inquiètent aussi des marges infimes qu’il leur reste pour investir et innover. Pour beaucoup d’entre eux, il s’agit même d’une pure question de survie.

En outre, une indexation des salaires de plus de 10%, prévue en janvier 2023, attend encore les entreprises alimentaires belges. Cela risque de les rendre moins compétitives, car les augmentations de salaires dans les pays voisins, vers lesquels notre pays exporte traditionnellement beaucoup, sont beaucoup plus faibles. Avec la lasagne fiscale en Belgique, cela encourage aussi de plus en plus les achats transfrontaliers.

Pour information, selon ce site, «Les ‘lasagnes fiscales’ belges poussent les consommateurs à l’étranger» près de 4 Belges sur 10 achètent des boissons moins chères au-delà des frontières. Il s’agit donc d’une ‘lasagne de taxes’ qui touche l’alimentation et les boissons, et qui explique pour partie l’exode physique du consommateur à l’étranger.
Même écho du côté français avec l’ANIA (Association nationale des industries alimentaires) avec ce communiqué du 30 août 2022, «Disponibilité et flambée des prix – demain des rayons vides si la production alimentaire n’est pas préservée coûte que coûte».

Le contexte est connu de tous : perspective d’ici cet hiver d’une coupure totale du gaz russe qui impliquerait un rationnement d’énergie et des coupures de courant auxquels s’ajoute une explosion des prix. L’ANIA tire la sonnette d’alarme. Aujourd’hui, les entreprises alimentaires sont très inquiètes pour le maintien de leur production. Une problématique énergétique qui vient fragiliser encore davantage un secteur agroalimentaire pris en étau entre la nécessité d’une juste rémunération des agriculteurs et la guerre des prix incessante que se mènent les distributeurs.

«Comment répondre à l’angoisse d’un patron de PME qui, en 2021 payait 2,5 millions d’euros au titre de l’énergie, qui en paye… 6,5 millions en 2022 et qui en payera… 14 millions en 2023 ? Quelles réponses lui apporter ? A aujourd’hui nous n’en avons pas…»
Jean-Philippe André, Président de l’ANIA.

lundi 5 septembre 2022

Le SARS-CoV-2 peut survivre à long terme sur de la viande congelée, selon une étude

«Le SARS-CoV-2 peut survivre à long terme sur de la viande congelée, selon une étude», source ASM News.

Des substituts du SARS-CoV-2 peuvent survivre jusqu'à 30 jours sur des produits carnés au réfrigérateur ou au congélateur. Ces résultats sont publiés dans Applied and Environmental Microbiology, une revue de l'American Society for Microbiology. L’article est disponble en intégralité.

«L’étude a été menée en utilisant du poulet, du bœuf, du porc et du saumon, et des virus de substitution avec des pointes (spikes) similaires à celles du SARS-CoV-2, comme substituts», a dit la première auteure Emily S. Bailey. Les chercheurs ont conservé les produits à la fois à des températures de réfrigération (4°C) et de congélation (-20°C).

«Bien que vous ne puissiez pas conserver la viande au réfrigérateur pendant 30 jours, vous pouvez la conserver au congélateur aussi longtemps», a déclaré Bailey. «Nous avons même découvert que les virus pouvaient être cultivés après [avoir été congelés] pendant cette période.» Bailey est professeur adjoint, Département de santé publique, Collège de pharmacie et des sciences de la santé, Université Campbell, Buies Creek, Caroline du Nord.

Les chercheurs ont entrepris cette étude après avoir appris que des épidémies de COVID-19 se produisaient en Asie du Sud-Est sans transmission communautaire préalable. Les rapports de ces communautés «suggèrent que les produits de viande conditionnés, produits dans des zones où le SARS-CoV-2 circulait, auraient pu être la source du virus», a dit Bailey. «Notre objectif était de déterminer si des virus similaires pouvaient ou non survivre dans cet environnement.»

L’étude est importante car le SARS-CoV-2 peut se répliquer dans l'intestin, ainsi que dans les voies respiratoires», a dit Bailey.

Dans l'étude, les chercheurs ont utilisé 1 virus à ARN avec une enveloppe lipidique et 2 coronavirus animaux, le virus de l'hépatite murine et le virus de la gastro-entérite transmissible comme substituts.

Les 3 virus ont déjà été utilisés comme substituts du SARS-CoV-2, généralement avec des réductions plus importantes de leur nombre observées à la réfrigération qu'aux températures de congélation. La réduction des effectifs variait également selon l'aliment utilisé.

«Des efforts continus sont nécessaires pour prévenir la contamination des aliments et des surfaces de transformation des aliments, des mains des employés et des ustensiles de transformation des aliments tels que les couteaux», ont écrit les chercheurs. De plus, il doit être pris en compte «l'absence ou l'insuffisance de la désinfection de ces aliments.»

Aux lecteurs du blog
La revue PROCESS Alimentaire censure pour une triste question d’argent les 10 052 articles initialement publiés gracieusement par mes soins de 2009 à 2017 sur le blog de la revue, alors que la revue a bénéficié de la manne de la publicité faite lors de la diffusion de ces articles. La revue PROCESS Alimentaire a fermé le blog et refuse tout assouplissement. Derrière cette revue, il faut que vous le sachiez, il y a une direction aux éditions du Boisbaudry, pleine de mépris, et un rédacteur en chef complice !

mardi 28 juin 2022

Qu'en est-il de la survie de pathogènes dans des mélanges d'éthanol et de jus à température ambiante ?

Bien entendu l'article ci-après n'incite à la consommation de boissons alcoolisées, et conseille à boire avec modération ...

Cela étant, voici un article qui traite de la survie de Escherichia coli O157, Salmonella et Listeria monocytogenes dans des mélanges d'éthanol et de jus à température ambiante, source Food Protection Trends.

Résumé
Certains bars et restaurants ont commencé à proposer des cocktails de fruits et légumes alcoolisés à température ambiante. Les opérateurs pensent souvent que la présence d’éthanol rend cette pratique sûre, et à l'inverse, certains services réglementaires se posent la question de la sécurité sanitaire. Il a été rapporté que l'éthanol peut inhiber la croissance de certaines bactéries à des concentrations commençant à 8-10% et peut être biocide à des concentrations ≥ 30%. Dans cette étude, Escherichia coli O157, Salmonella et Listeria monocytogenes ne se sont pas développés dans des mélanges de purée de banane, de purée de poire, de jus d'orange et de jus de pomme préparés avec des concentrations d'éthanol de 10 à 50% à 25°C. Les agents pathogènes inoculés n'ont pas été détectés dans le jus plus éthanol à 40 ou 50% après 48 heures. Les jus avec des concentrations d'éthanol de 10 à 30% ont présenté différentes réductions logarithmiques au fil du temps pour chacun des agents pathogènes introduits. Cette étude a des implications sur la façon dont les services réglementaires évaluent le risque des mélanges de jus et d'éthanol conservés à température ambiante en vertu du Food Code de la FDA des États-Unis. Les opérateurs qui souhaitent afficher des mélanges d'éthanol et de jus de fruits à température ambiante doivent s'assurer d'un pH < 4,2 ou d'une combinaison de valeurs de pH et d'activité de l'eau basées sur le tableau B du Food Code de la FDA, ou encore ils doivent conserver le produit réfrigéré à une température ≤ 5°C.

Aux lecteurs du blog
Je suis en conflit depuis plusieurs années avec la revue PROCESS Alimentaire pour une triste question d’argent qui permettrait de récupérer et de diffuser correctement les 10 052 articles initialement publiés gracieusement par mes soins de 2009 à 2017 sur le blog de la revue, alors qu’elle a bénéficié de la manne de la publicité faite lors de la diffusion de ces articles. La revue PROCESS Alimentaire s’est comportée et continue de se comporter en censeur et refuse tout assouplissement pour la modique somme de 500 euros. N’ayant pas les moyens d’aller devant la justice, je leur fait ici de la publicité gratuite. Derrière cette revue, il y a une direction dégueulasse et un rédacteur en chef complice !

jeudi 8 juillet 2021

De nouvelles informations sur les stratégies de survie de Salmonella

L'agent pathogène intracellulaire Salmonella enterica survit à l'intérieur des cellules hôtes en utilisant diverses machineries moléculaires et réseaux de trafic cellulaire pour soutenir sa propre croissance. Crédit: Aleksandra Krolik/EMBL

«De nouvelles informations sur les stratégies de survie de Salmonella», source communiqué de l’European Molecular Biology Laboratory (EMBL).

Les scientifiques de l'EMBL mettent en lumière la façon dont Salmonella détourne la machinerie de sa cellule hôte pour favoriser sa propre croissance et sa propre reproduction

Nos cellules combattent les envahisseurs microbiens en les engloutissant dans des sacs membranaires, des environnements hostiles dans lesquels les agents pathogènes sont rapidement détruits.

Cependant, l'agent pathogène Salmonella enterica, qui se développe et se reproduit à l'intérieur de nos cellules, a développé des moyens de détoxifier ces compartiments hostiles, les transformant en un foyer confortable où Salmonella peut survivre et prospérer.

Une équipe de scientifiques dirigée par le chef du groupe EMBL, Nassos Typas, a découvert de nouveaux détails sur les stratégies de survie de Salmonella. Les chercheurs ont analysé les interactions protéiques dans les cellules infectées par Salmonella pour identifier les divers processus biologiques de la cellule hôte que la bactérie utilise. Salmonella cible et modifie les mécanismes et les voies des protéines cellulaires, dans lesquelles plusieurs protéines travaillent ensemble, à l'aide de protéines dites effectrices, qu'elle injecte dans les cellules hôtes. Au total, Salmonella est connue pour libérer plus de 30 protéines effectrices dans les cellules infectées pour détourner les nutriments et se protéger. Cependant, les fonctions de bon nombre de ces protéines et les protéines de la cellule hôte avec lesquelles elles interagissent sont largement inconnues.

Pour trouver ces interactions protéiques énigmatiques, les scientifiques de l'EMBL ont génétiquement modifié 32 souches de Salmonella en ajoutant des tags d'identification aux protéines individuelles de Salmonella, en affectant une protéine à chaque souche bactérienne. Les tags d'identification agissent comme une poignée que les scientifiques peuvent saisir dans leurs expériences. Cette approche de modification des protéines effectrices directement dans leur hôte est une percée. Cela permet aux chercheurs de capturer les protéines bactériennes une fois qu'elles ont été sécrétées dans les cellules infectées et de les extraire avec toutes les protéines de la cellule hôte qui leur sont liées. Ces protéines en interaction sont ensuite identifiées à l'aide d'une technique appelée spectrométrie de masse. «La nouvelle approche présente de nombreux avantages par rapport aux stratégies expérimentales précédentes. En particulier, elle caractérise l'ensemble des interactions protéine-protéine de l’hôte et du pathogène dans les cellules infectées par un agent pathogène vivant, ressemblant étroitement à ce qui se produit dans un organisme hôte lors d'une infection à Salmonella», explique Joel Selkrig, scientifique du groupe de Typas et l'un des les deux auteurs principaux de l'étude.

En utilisant leur nouvelle approche, les scientifiques de l'EMBL ont identifié 421 interactions auparavant inconnues entre les protéines de Salmonella et les protéines de la cellule hôte, ainsi que 25 interactions qui avaient été décrites auparavant.

«Nous avons découvert que plusieurs effecteurs de Salmonella interagissent physiquement avec plusieurs protéines que la cellule hôte utilise pour transporter le cholestérol. De cette façon, le trafic de cholestérol peut être détourné à des fins propres à Salmonella», explique Philipp Walch, qui a récemment terminé son doctorat à l'EMBL Heidelberg et partage la première paternité de l'étude avec Joel.

Le cholestérol est un composant essentiel des membranes biologiques qui entourent nos cellules et les structures qui les composent. Salmonella utilise le cholestérol pour modifier la composition des sacs membranaires qui l'entourent, rendant potentiellement la membrane plus rigide et renforçant la barrière qui sépare Salmonella des systèmes de détection et de défense cellulaire, qui sont présents dans le cytoplasme de la cellule hôte.

Les scientifiques ont également trouvé de nouveaux indices sur le fonctionnement de deux autres stratégies de survie. L'une de ces stratégies consiste à remodeler le réseau de fibres protéiques qui sont utilisées pour transporter le matériel à l'intérieur de la cellule. Une autre stratégie consiste à interférer avec la fonction d'une protéine de la cellule hôte qui régule les contacts entre les membranes pour faciliter l'échange de lipides et de petites molécules. Les deux stratégies peuvent aider Salmonella à renforcer sa membrane protectrice et à éviter la détection par les systèmes de défense de la cellule hôte.

Les résultats récents font suite à des recherches publiées par le groupe de Typas en 2020, dans lesquelles les chercheurs ont décrit comment l'infection à Salmonella peut entraîner une forme inflammatoire de mort cellulaire. L'étude actuelle a impliqué des scientifiques de l'EMBL et des collègues de l'Imperial College de Londres, Royaume-Uni, le Centre Helmholtz pour la recherche sur les infections à Braunschweig, Allemagne et Rocky Mountain Laboratories à Hamilton, Montana, États-Unis, qui fait partie du National Institute of Allergy and Infectious Diseases.

mardi 30 mars 2021

Évaluation de la cinétique de survie et de lésion sub-létale de Listeria monocytogenes sous différents stress liés à la transformation des aliments

Voici le résumé d'une étude parue dans International Journal of Food Microbiology qui a pour titre, Évaluation de la cinétique de survie et de lésion sub-létale de Listeria monocytogenes sous différents stress liés à la transformation des aliments.

Faits saillants

  • Différents traitements de transformation des aliments peuvent affecter différemment les lésions causées à L. monocytogenes.
  • L'acide peracétique peut induire des niveaux importants de lésions par rapport à d'autres stress.
  • La température, le temps d'exposition et le diluant du facteur de stress affectent l'étendue de la lésion.
  • Les lésions induites par le stress peuvent ne pas être corrélées à la létalité.
  • La survie et la lésion liées aux désinfectants sont affectées par le milieu pauvre en nutriments et à haute salinité.

Résumé

L'agent pathogène d'origine alimentaire L. monocytogenes peut être présent dans les environnements de transformation des aliments où il est exposé à divers facteurs de stress. Ces facteurs antimicrobiens, qui visent à éliminer l'agent pathogène, peuvent induire des lésions sublétales des cellules bactériennes.

Dans la présente étude, nous avons étudié l'efficacité de différents traitements (stress) pertinents pour la transformation et la conservation des aliments ainsi que les méthodes de désinfection pour générer des lésions sublétales à 4°C et 20°C pour deux souches de L. monocytogenes, ScottA et EGDe.

De plus, nous avons évalué la survie et l'étendue des lésions causées à L. monocytogenes après une exposition à des désinfectants couramment utilisés (acide peracétique et chlorure de benzalkonium), suite à une habituation dans un milieu pauvre en nutriments et à haute salinité.

Chaque stress avait un impact différent sur la cinétique de survie et de lésion de L. monocytogenes. Les niveaux de lésion les plus élevés ont été causés par l'acide peracétique qui, à 4°C, a généré des populations élevées de cellules lésées sans perte de viabilité. L'acide lactique et le chauffage sont d'autres facteurs de stress induisant des lésions.

L'habitude sur le long terme dans un milieu à faible teneur en nutriments et à forte salinité (4°C) et l'exposition ultérieure aux désinfectants ont entraîné une survie et des lésions plus élevées dans le chlorure de benzalkonium et une survie accrue, mais avec des niveaux de lésions plus faibles, dans l'acide peracétique à 20°C.

Pris ensemble, ces résultats mettent en évidence le risque potentiel pour la sécurité des aliments découlant de l'apparition de cellules endommagées par les méthodes de transformation des aliments couramment utilisées. Par conséquent, afin d'évaluer avec précision l'impact d'une méthode antimicrobienne, son potentiel d'induire des lésions sublétales doit être pris en compte avec sa létalité.

samedi 13 mars 2021

Les bactéries s'adaptent aux conditions changeantes de l'appareil digestif

Afin d'augmenter les chances de survie au contact des cellules hôtes eucaryotes, les bactéries symbiotiques et pathogènes ont développé des méthodes pour influencer le comportement des cellules hôtes. L'injectisome du système de sécrétion de type III (T3SS) est une machinerie moléculaire utilisée par divers genres bactériens pathogènes, notamment Salmonella, Shigella, Escherichia pathogène, Pseudomonas et Yersinia pour délivrer des toxines moléculaires, protéines effectrices, directement dans les cellules hôtes eucaryotes. Des chercheurs du laboratoire d'Andreas Diepold du MPI pour la microbiologie terrestre ont maintenant découvert qu'une dynamique élevée de cet appareil permet aux bactéries de s'adapter rapidement aux conditions changeantes du tube digestif. © Max Planck Institute for Terrestrial Microbiology.

«Les bactéries s'adaptent aux conditions changeantes de l'appareil digestif», source Max Planck Institute for Terrestrial Microbiology.

Une étude montre comment les bactéries pathogènes peuvent s'adapter à diverses conditions du tube digestif. Source Nature Communications.

Basique, acide, basique encore, pour les bactéries pathogènes telles que Salmonella, le tube digestif humain est un changement radical.

Alors, comment les bactéries parviennent-elles à réagir à ces changements?

Une équipe de chercheurs de l'Institut Max Planck (MPI) pour la microbiologie terrestre à Marburg dirigée par Andreas Diepold a désormais fourni une explication possible: les bactéries pathogènes peuvent changer des composants de leur appareil d'injection à la volée, comme changer des pneus d'une voiture en mouvement, pour permettre une réponse rapide.

Certains des pathogènes humains les plus connus - de la bactérie de la peste Yersinia pestis au pathogène de la diarrhée Salmonella - utilisent une minuscule aiguille hypodermique pour injecter des protéines pathogènes dans les cellules de leur hôte, les manipulant ainsi. Cette aiguille fait partie du système de sécrétion dit de type III (T3SS), sans lequel la plupart de ces agents pathogènes ne peuvent pas se répliquer dans l'organisme.

Ce n'est que récemment qu'il a été découvert que de grandes parties du T3SS ne sont pas fermement ancrées à la partie principale du système, mais sont constamment échangées pendant le fonctionnement. Cependant, la signification de ce phénomène n'est pas claire. Des chercheurs du laboratoire d'Andreas Diepold de l'Institut Max Planck de microbiologie terrestre ont maintenant découvert que ce comportement dynamique permet aux bactéries d'adapter rapidement la structure et la fonction de l'appareil d'injection aux conditions extérieures.

La digestion humaine commence par un environnement neutre à légèrement alcalin dans la bouche et l'œsophage, que l'ajout d'acides gastriques change soudainement en fortement acide dans l'estomac - un environnement dans lequel de nombreux pathogènes ne survivent pas. La cible réelle de Yersinia enterocolitica, la bactérie pathogène étudiée dans l'étude, est l'intestin. Ici, les conditions de pH neutre sont rétablies.

Mais comment les bactéries parviennent-elles à s'adapter si rapidement aux conditions changeantes et comment cela est-il contrôlé? Le doctorant Stephan Wimmi, premier auteur de l'étude, a pu démontrer qu'une protéine dans la membrane de la bactérie agit comme un capteur de la valeur du pH. Dans une collaboration avec le laboratoire d'Ulrike Endesfelder à l'Institut Max Planck, il a découvert que cette protéine devient plus mobile à un pH bas (= acide) et transmet ainsi le signal aux composants du T3SS à l'intérieur de la bactérie.

La flexibilité empêche les ratés

Dans un environnement acide comme l'estomac, les composants mobiles ne se lient pas au reste de l'appareil (y compris l'aiguille elle-même), de sorte que le système d'injection reste inactif. Dès que les bactéries pénètrent dans un environnement au pH neutre, comme on le trouve dans l'intestin, les protéines dynamiques se réassemblent, de sorte que le T3SS puisse rapidement devenir actif sur ces sites, au désarroi éventuel de la personne infectée.

Les chercheurs pensent que l'effet nouvellement découvert pourrait permettre aux bactéries d'empêcher un «raté» consommateur d'énergie du système de sécrétion dans le mauvais environnement, ce qui pourrait même activer la réponse immunitaire de l'hôte. D'autre part, la mobilité et la dynamique de la structure permettent au système d'être rapidement remonté et activé dans des conditions appropriées.

La mobilité et l'échange de protéines sont de plus en plus découverts dans les complexes et les nanomachines dans tous les domaines de la vie ; cependant, l'utilité de ces dynamiques n'est généralement pas comprise. Les nouveaux résultats de Marburg montrent comment l'échange de protéines permet de répondre de manière flexible aux circonstances extérieures - un immense avantage, pas seulement pour les bactéries.

samedi 9 janvier 2021

La croissance et la survie de la Listeria attachée sur de la laitue et de l'acier inoxydable varient selon la souche et le type de surface

«La croissance et la survie de la Listeria attachée sur de la laitue et de l'acier inoxydable varient selon la souche et le type de surface», source article paru Journal of Food Protection.

Résumé

Listeria monocytogenes, pathogène d'origine alimentaire, vit comme un saprophyte dans la nature et peut adhérer et se développer sur des surfaces aussi diverses que des feuilles, des sédiments et de l'acier inoxydable. Pour discerner les mécanismes utilisés par L. monocytogenes pour l'attachement et la croissance sur diverses surfaces, nous avons étudié les interactions entre le pathogène sur de la laitue et de l'acier inoxydable.

Un panel de 24 souches (23 de Listeria monocytogenes et 1 L. innocua) a été étudié pour l'attachement et la croissance sur de la laitue à 4°C et 25°C et sur l’acier inoxydable à 10°C et 37°C. La croissance pendant la nuit des cellules attachées a entraîné une augmentation de 0 à 3 log sur de la laitue, selon la souche et la température. Parmi les souches les moins performantes sur la laitue, deux provenaient d'une importante épidémie de melons cantaloups, ce qui indique que les facteurs importants pour les interactions avec le cantaloup peuvent être différents de ceux requis sur les tissus de laitue. Les souches qui se cultivaient le mieux sur la laitue appartenaient aux sérotypes 1/2a, 1/2b et 4b et provenaient de fromages, de pommes de terre et d'eau/sédiments à proximité des champs de production.

La microscopie confocale de L. monocytogenes marquée avec une protéine fluorescente verte exprimée de manière constitutive a indiqué des associations avec les bords coupés et les veines des feuilles de laitue. Sur les coupons en acier inoxydable, il y avait une augmentation de 5 à 7 log à 10°C après 7 jours et une augmentation de 4 à 7 log à 37°C après 40 h.

Statistiquement, la croissance sur la surface en acier inoxydable était meilleure pour les souches de sérotype 1/2a que pour les souches de sérotype 4b, même si certaines souches du sérotype 4b se sont bien développées sur les coupons en acier inoxydable. Ces dernières comprenaient des souches provenant de produits et d'eau/sédiments. Certaines souches étaient adaptées aux deux environnements, tandis que d'autres présentaient une variabilité entre les deux surfaces différentes.

Une analyse plus approfondie de ces souches devrait révéler les facteurs moléculaires nécessaires à l'adhérence et à la croissance superficielle de L. monocytogenes sur différentes surfaces biotiques et abiotiques.

mercredi 9 décembre 2020

Quand des souches de E. coli jouent au jeu pierre-papier-ciseaux, ce n'est pas la plus forte souche qui survit

«Quand des souches de E. coli jouent au jeu pierre-papier-ciseaux, ce n'est pas la plus forte souche qui survit», source UC San Diego.

Une nouvelle étude de l'UC San Diego révèle une dynamique cachée des colonies de bactéries.

Les bactéries sont partout autour de nous, pas seulement dans les salles de bain ou les plans de travail de la cuisine, mais aussi à l'intérieur de notre corps, y compris dans les tumeurs, où le microbiote se développe souvent. Ces «petites écologies» peuvent détenir la clé des thérapies médicamenteuses contre le cancer et en apprendre davantage à leur sujet peut aider à développer de nouveaux traitements vitaux.

Que se passe-t-il lorsque différentes souches de bactéries sont présentes dans le même système? Coexistent-elles? Les plus fortes survivent-elles ? Dans un jeu microbien de pierre-papier-ciseaux, des chercheurs de l’Institut BioCircuits de l’Université de Californie à San Diego ont découvert une réponse surprenante. Leurs résultats intitulés « Survival of the weakest in non-transitive asymmetric interactions among strains of E. coli » (Survie des interactions asymétriques non transitives parmi les souches de E. coli les plus faibles), ont été publiés dans une édition récente de Nature Communications.

L'équipe de recherche était composée du professeur de bioingénierie et de biologie moléculaire Jeff Hasty, Michael Liao et Arianna Miano, tous deux étudiants diplômés en bioingénierie et Chloe Nguyen, étudiante de premier cycle en bioingénierie. Ils ont conçu trois souches de E. coli (Escherichia coli) afin que chaque souche produise une toxine qui pourrait tuer une autre souche, tout comme un jeu de pierre-papier-ciseaux.

Lorsqu'on lui a demandé comment l'expérience avait eu lieu, Hasty a commenté: «En biologie synthétique, les circuits géniques complexes sont généralement caractérisés par des bactéries qui poussent dans des cultures liquides bien mélangées. Cependant, de nombreuses applications impliquent des cellules qui sont limitées à se développer sur une surface. Nous voulions comprendre le comportement des petites écologies artificielles lorsque les espèces en interaction se développent dans un environnement plus proche de la façon dont les bactéries sont susceptibles de coloniser le corps humain.»

Les chercheurs ont mélangé les trois populations et les ont laissées pousser sur une boîte de Petri pendant plusieurs semaines. Lorsqu'ils sont revenus, ils ont remarqué que, dans plusieurs expériences, la même population occupait toute la surface - et ce n'était pas la plus forte (la souche avec la toxine la plus puissante). Curieux de connaître les raisons possibles de ce résultat, ils ont conçu une expérience pour dévoiler les dynamiques cachées en jeu.

Il y avait deux hypothèses, soit la population moyenne (appelée «l'ennemie de la plus forte» comme la souche que la plus forte voudrait attaquer) va gagner, soit la population la plus faible va gagner. Leur expérience a montré que, étonnamment, la deuxième hypothèse était vraie: la population la plus faible a systématiquement pris le dessus sur la boîte.

Pour en revenir à l'analogie pierre-papier-ciseaux, si nous supposons que la souche «pierre» de E.coli a la toxine la plus forte, elle tuera rapidement la souche «ciseaux». Puisque la souche ciseaux était la seule capable de tuer la souche «papier», la souche de papier n'a plus d'ennemi. Elle est libre de nuire à la souche pierre sur une période de temps, tandis que la souche pierre est incapable de se défendre.

Pour donner un sens au mécanisme derrière ce phénomène, les chercheurs ont également développé un modèle mathématique qui pourrait simuler des combats entre les trois populations en partant d'une grande variété de profils et de densités. Le modèle a pu montrer comment les bactéries se comportaient dans plusieurs scénarios avec des modèles spatiaux communs tels que des rayures, des amas isolés et des cercles concentriques. Ce n'est que lorsque les déformations ont été initialement réparties dans le modèle d'anneaux concentriques avec le plus fort au milieu, qu'il a été possible pour la plus forte contrainte de prendre le dessus sur la boîte de gélose.

On estime que les microbes sont plus nombreux que les cellules humaines 10 contre 1 dans le corps humain et plusieurs maladies ont été attribuées à des déséquilibres au sein de divers microbiomes. Les déséquilibres au sein du microbiome intestinal ont été liés à plusieurs troubles métaboliques et inflammatoires, au cancer et même à la dépression. La capacité de concevoir des écosystèmes équilibrés qui peuvent coexister pendant de longues périodes peut offrir de nouvelles possibilités passionnantes pour les biologistes synthétiques et de nouveaux traitements de santé. Les recherches menées par le groupe de Hasty peuvent aider à jeter les bases d’un jour, concevoir des microbiomes synthétiques sains qui peuvent être utilisés pour fournir des composés actifs pour traiter divers troubles métaboliques ou maladies et tumeurs.

La vice-chancelière de la recherche, Sandra Brown, a déclaré: «L'association de la biologie moléculaire et de la bioningénierie a permis la découverte avec le potentiel d'améliorer la santé des personnes dans le monde. Il s'agit d'une découverte qui ne s'est peut-être jamais produite s'ils ne travaillaient pas en collaboration. C'est un autre témoignage de la puissance de la recherche multidisciplinaire de l'UC San Diego.»

Modèle informatique de trois souches de E. coli, placées en groupes, pour voir quelle souche dominera. Etude menée par UC San Diego's BioCircuits Institute.

lundi 19 octobre 2020

Survie de Salmonella sur viande rouge en réponse à la chaleur sèche

Une recherche parue dans
Journal of Food Protection a étudié la survie de Salmonella sur viande rouge en réponse à la chaleur sèche.

Résumé
La viande rouge est associée à des éclosions à Salmonella, ce qui a des effets négatifs sur l'industrie de la transformation.

Peu de travaux ont été rapportés sur l'utilisation de la chaleur sèche par opposition à la chaleur humide contre Salmonella sur la viande rouge.

Nous avons déterminé l'effet du séchage à 25°C et de la chaleur sèche à 70°C avec ~ 10% d'humidité relative (HR) pendant 1 h vis-à-vis de onze souches de Salmonella de plusieurs sérotypes sur du bœuf, de l'agneau, de la chèvre et du caoutchouc en tant que surface inerte.
Chaque souche comprenant ~108 ufc/ml a été inoculée (100μl) sur ±1g (cm2) de chaque surface et laissée se fixer pendant 15 min dans un tube de microcentrifugeuse. Les échantillons ont ensuite été exposés à 70°C et 25° C avec 10% d'humidité relative dans un bloc chauffant.

Les dénombrements de Salmonella survivants sur les surfaces ont été dénombrés sur sur milieu en couche mince. Si les dénombrements étaient inférieurs à la limite de détection (LD), (2,01 log ufc/cm2), les cellules de Salmonella ont été enrichies avant étalement pour déterminer la présence de cellules viables.

La perte d'eau (%) de la viande après 25°C et 70°C a été déterminée. Des génomes entiers de Salmonella ont été étudiés pour identifier la présence/l'absence de gènes de réponse au stress (n = 30) liés à la chaleur sèche qui peuvent contribuer à la survie de Salmonella.
La survie de Salmonella à 25°C était significativement plus élevée sur toutes les surfaces (~6,09-7,91log ufc/cm2) par rapport à 70°C (~3,66-6,33log ufc/cm2). Sur le caoutchouc, le nombre de Salmonella était < LD à 70°C. La perte d'eau à 70°C (~17,72-9,89%) était significativement plus élevée par rapport à 25°C (~2,98-4,11%). Salmonella n'a pas été détecté sur le caoutchouc alors que la survie s'est produite sur toutes les viandes rouges à 70°C, ce qui suggère son effet protecteur contre l'effet de la chaleur.

Toutes les souches de Salmonella portaient 30 gènes de réponse au stress qui ont probablement contribué à sa survie. Une souche de S. Typhimurium 2470 multi-résistante aux antibiotiques a présenté une augmentation de la résistance à la chaleur à 70°C sur du bœuf et de l'agneau par rapport à d'autres souches.

Nos travaux montrent que la chaleur sèche à 70°C pendant 1 h contre Salmonella sur une viande rouge n'est pas une approche pratique pour les réduire ou les éliminer efficacement de la viande rouge.